La ICP27 del virus del herpes simple tipo 1 es una proteína reguladora esencial

Los cinco genes inmediatamente tempranos del virus del herpes simple se expresan durante las etapas iniciales del ciclo infeccioso, y se ha demostrado que ciertas proteínas inmediatamente tempranas desempeñan una función reguladora en la posterior expresión génica viral. Hasta hace poco, las propiedades funcionales de solo una proteína inmediatamente temprana, ICP4, se habían examinado en detalle, principalmente debido a que solo se habían aislado mutantes en el gen de ICP4. Presentamos aquí la caracterización genética y fenotípica de cuatro mutantes termosensibles del virus del herpes simple tipo 1 (tsY46, tsE5, tsE6 y tsLG4) que han comenzado a dilucidar la(s) función(es) de una segunda proteína inmediatamente temprana, ICP27. Los cuatro mutantes se complementaron entre sí de manera ineficiente o no se complementaron en absoluto, lo que indica que presentan defectos en la misma función. Las pruebas de rescate de marcadores ubicaron las mutaciones en tsY46 y tsE5 en secuencias que codifican el transcrito para ICP27; las mutaciones en tsE6 y tsLG4 se encuentran en estas secuencias o cerca de ellas. La capacidad de la ICP27 de tipo silvestre expresada a partir de un gen clonado para complementar tsY46 y tsLG4 constituye evidencia adicional de que estos mutantes presentan defectos en una función asociada a ICP27. La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio de los polipéptidos de células infectadas por mutantes mostró que ciertos polipéptidos inmediatamente tempranos (alfa) se sobreprodujeron, mientras que se sintetizaron niveles significativos de proteínas tempranas (beta) y niveles drásticamente reducidos de varias proteínas tardías (gamma) a la temperatura no permisiva. Curiosamente, se observó que los mutantes formaban un espectro con respecto a sus capacidades relativas para inducir la expresión de una serie de polipéptidos, especialmente aquellos de la clase temprana retardada (beta gamma). De manera coherente con su capacidad para inducir la expresión de polipéptidos tempranos, todos los mutantes indujeron la síntesis de niveles sustanciales de ADN viral a la temperatura no permisiva. En conjunto, los resultados de estos estudios demuestran que ICP27 desempeña una función reguladora esencial en la replicación viral, que esta función es necesaria tras el inicio de la expresión génica temprana y la síntesis de ADN viral, y que la incapacidad de los mutantes para inducir la síntesis de proteínas tardías es independiente de la síntesis de ADN viral.