Expansión de las células humanas repobladoras NOD/SCID mediante el factor de células madre, el ligando Flk2/Flt3, la trombopoyetina, IL-6 y el receptor soluble de IL-6

Aquí, demostramos una expansión ex vivo significativa de células madre hematopoyéticas humanas capaces de repoblar en ratones NOD/SCID. Usando una combinación de factor de células madre (SCF), ligando Flk2/Flt3 (FL), trombopoyetina (TPO) y un complejo de IL-6 y receptor soluble de IL-6 (IL-6/sIL-6R), cultivamos células CD34(+) de sangre del cordón umbilical durante 7 días y trasplantamos estas células en ratones NOD/SCID. La injerto en médula ósea se consideró exitoso cuando los animales receptores contenían números medibles de células humanas CD45(+) 10-12 semanas después del trasplante. Cuando las células se cultivaron con SCF+FL+TPO+IL-6/sIL-6R, 13 de 16 receptores fueron injertados con éxito, y las células CD45(+) representaron el 11.5% de las células de médula ósea en los receptores injertados. Las células cultivadas con un subconjunto de estos factores se injertaron con menos eficiencia, tanto medida por la frecuencia de trasplantes exitosos como por la prevalencia de células CD45(+). En animales que recibieron células cultivadas con los 4 factores, las células humanas CD45(+) representaron varias líneas celulares, incluyendo un gran número de células CD34(+). La proporción de células CD45(+) en la médula de los receptores fue 10 veces mayor en los animales que recibieron estas células cultivadas que en aquellos que recibieron números comparables de células CD34(+) frescas, y la tasa de expansión se estimó en 4.2 veces mediante un método de dilución limitante. La adición de IL-3 a la combinación de citoquinas abrogó la capacidad de repoblación de las células expandidas. El presente estudio puede proporcionar un nuevo método de cultivo para la expansión de células madre hematopoyéticas humanas transplantables adecuadas para aplicaciones clínicas.