La proteína de membrana externa codificada por plásmido YadA media la unión específica de yersinias enteropatógenas a varios tipos de colágeno

La proteína de membrana externa codificada por plásmido YadA de las yersinias enteropatógenas está asociada con la patogenicidad. Recientemente, se informó sobre la unión de colágeno de las yersinias positivas para YadA sin caracterización detallada (L. Emödy, J. Heesemann, H. Wolf-Watz, M. Skurnik, G. Kapperud, P. O'Toole y T. Wadström, J. Bacteriol. 171:6674-6679, 1989). ParaElucidar la naturaleza de la unión de colágeno a YadA, utilizamos una cepa recombinante de Yersinia que expresa el gen YadA clonado. Se demostró la unión directa de yersinias positivas para YadA a colágenos en experimentos de afluencia en filtros de nitrocelulosa. Se probaron diversos tipos de colágeno en un amplio rango de concentraciones para su capacidad de bloquear la unión de colágeno tipo II marcado con 125I a yersinias positivas para YadA. Los resultados indican un sitio(s) de unión específica para YadA en los tipos de colágeno I, II, III, IV, V y XI. En contraste, el colágeno tipo VI no se unió a YadA. Para caracterizar los sitios de unión de manera más precisa, se investigaron cadenas de colágeno aisladas y fragmentos de bromuro de cianógeno. Estos estudios revelaron que la unión de YadA al colágeno tipo I se limita a la cadena alfa 1(I), mientras que el sitio de unión dentro del colágeno tipo XI se localiza en la cadena alfa 3(XI). La alfa 2(I), alfa 1(XI) y alfa 2(XI) no se unieron a YadA. Lo más interesante es que, en la cadena alfa 1(II) el sitio de unión específica para YadA reside en el fragmento de bromuro de cianógeno CB10. Este último podría indicar un sitio de unión que no depende de la conformación. Basado en estos hallazgos, una mayor fragmentación y la síntesis de péptidos podrían permitir la definición de la(s) secuencia(s) de péptidos relevantes para la unión de YadA.