Activación transcripcional por potenciadores virales: Dependencia crítica de las interacciones entre la matriz extracelular y las células epiteliales mamarias

Resumen Las interacciones entre la matriz extracelular (MEC) y las células son esenciales para la regulación de muchos genes en tipos de células diferenciadas. Una serie de vectores de expresión que funcionan bien en células cultivadas en plástico para cultivo celular parecen estar inactivos o activos esporádicamente in vivo. Supusimos que estas respuestas también podrían verse influenciadas por la MEC. Por lo tanto, examinamos tres potenciadores virales comúnmente utilizados y encontramos que todos respondieron positiva o negativamente a la presencia de MEC exógena. Utilizando células epiteliales mamarias de ratón, encontramos que un potenciador del virus del tumor mamario de ratón vinculado a su propio promotor o a un promotor truncado (y por sí mismo inactivo) de β-caseína impulsó la transcripción de manera eficiente solo cuando las células estaban en contacto con una MEC (más de 100 veces de inducción sobre el plástico para cultivo celular). De manera similar, el potenciador del citomegalovirus fue más activo en células en contacto con MEC. En contraste, el potenciador del virus simio 40, vinculado al promotor de β-caseína, fue 12 veces más activo en células sobre plástico para cultivo celular. Esta actividad se redujo drásticamente cuando las células interactuaron con la MEC. Por lo tanto, concluimos que diferentes potenciadores pueden responder a la MEC activando o suprimiendo la transcripción. Esta observación tiene importantes implicaciones para entender los mecanismos de acción del promotor y para diseñar sistemas de expresión para el uso en terapia génica. © 1994 Wiley‐Liss, Inc.