Caracterización parcial de la base genética para el metabolismo de la sacarosa y la producción de nisin en Streptococcus lactis

Intentamos identificar los loci genéticos para la capacidad de fermentación de sacarosa (Suc+), la capacidad de producción de nisin (Nip+) y la resistencia al nisin (Nisr) en ciertas cepas de Streptococcus lactis. Para obtener evidencia genética que vincule el fenotipo Suc+ Nip+ Nisr a un plásmido distinto, se intentaron tanto la transferencia conyugal como la transformación. Un procedimiento de conjugación modificado para proteger a los receptores contra la acción inhibitoria del nisin permitió la transferencia conyugal del marcador Suc+ Nip+ Nisr de tres donantes Suc+ Nip+ Nisr a varios receptores. La frecuencia de transferencia osciló entre 1.7 x 10(-4) y 5.6 x 10(-8) por donante de entrada, dependiendo del par de apareamiento. Sin embargo, no se observó ADN plásmido adicional en estos transconjugantes. No se logró la transformación de S. lactis LM0230 al fenotipo Suc+ Nip+ Nisr utilizando el grupo de plásmidos de S. lactis ATCC 11454, a pesar de que otros plásmidos presentes en el grupo se transfirieron con éxito. Sin embargo, dos resultados implican la participación de ADN plásmido en la codificación del fenotipo Suc+ Nip+ Nisr. El marcador Suc+ Nip+ Nisr fue capaz de transferencia conyugal a un receptor deficiente en recombinación homóloga mediada por el hospedador (Rec-), y el marcador Suc+ Nip+ Nisr exhibió incompatibilidad bilateral de plásmido con varios plásmidos de lactose encontrados en S. lactis. Aunque nuestros resultados indican que el fenotipo Suc+ Nip+ Nisr está codificado por un plásmido, no se obtuvo evidencia física que vincule este fenotipo a un plásmido distinto.