La mejora de la termostabilidad de la claudina-3 de ratón en la formación de complejos con la región carboxilo-terminal de la enterotoxina de Clostridium perfringens mejora la calidad del cristal

Las junctiones estrechas regulan la permeación de sustancias a través de los espacios intercelulares como una barrera física o una vía paracelular, y desempeñan un papel importante en el mantenimiento del entorno interno. Las claudinas, que son proteínas transmembrana tetraspánicas, son componentes fundamentales de las junctiones estrechas. En mamíferos se han identificado 27 subtipos de claudina, cada uno de los cuales interactúa con subtipos específicos. Aunque se han determinado las estructuras cristalinas de varios subtipos, los mecanismos moleculares que subyacen a la especificidad de subtipos siguen sin estar claros. Aquí, se cristalizó la claudina-3 de ratón (mCldn3) en complejo con la región C-terminal de la enterotoxina de Clostridium perfringens (C-CPE) para el análisis estructural de un subtipo adicional de claudina. La mCldn3 sola fue difícil de cristalizar, pero la formación de complejos con C-CPE mejoró la termostabilidad de mCldn3 y facilitó su cristalización. La introducción de una mutación S313A en C-CPE mejoró aún más su termostabilidad, y los límites de resolución de los conjuntos de datos de difracción mejoraron de 8 Å para el complejo silvestre a 4.7 Å para el complejo mutante S313A.