Radioinmunoensayo de testosterona sin cromatografía

Una fracción de globulina rica en testosterona unida fue separada del suero por precipitación con sulfato de amonio. La testosterona y los esteroides relacionados fueron extraídos cuantitativamente de esta fracción con una mezcla de benceno y éter de petróleo y se midieron mediante radioinmunoensayo utilizando testosterona-3-tirosina metilo-125I y un antisero específico inducido contra la albúmina bovina testosterona-3-oxima. Este procedimiento de ensayo, que evita la cromatografía y usa solo una extracción con disolventes orgánicos, tuvo valores en blanco que se acercaron a cero. El error dentro y entre ensayos, medido como el coeficiente de variación, fue de 7.8% (n = 64) y 8.2% (n = 15), respectivamente. La cantidad mínima de hormona por muestra que se puede medir con buena fiabilidad es 0.17 ng. Esto proporciona suficiente hormona para tener en cuenta las pérdidas durante el procedimiento y para permitir muestras cuadruplicadas para radioinmunoensayo y un alícuota para determinar la recuperación. Aunque la introducción de un paso adicional de cromatografía en capa delgada se asoció con resultados que fueron aproximadamente un 10% más bajos que los obtenidos sin cromatografía, estas diferencias no fueron estadísticamente significativas. Se encontró una excelente concordancia entre la cantidad de hormona no etiquetada añadida al suero masculino, femenino o de embarazo y la cantidad medida por la técnica presente. La concentración media de testosterona (±SD) en nueve hombres normales, seis mujeres normales en ciclo y cuatro mujeres embarazadas (tercer trimestre) fue de 5.96 ± 2.02; 0.46 ± 0.21 y 0.97 ± 0.24 ng/ml, respectivamente. El método es simple y práctico; un técnico puede completar fácilmente 300 ensayos en cinco días laborales.