Investigación de los efectos de los aminoácidos del ciclo de la urea sobre la expresión de ALB y CEBPB en la línea celular de carcinoma hepatocelular humano FLC-4

Las líneas celulares son herramientas poderosas para la investigación sobre la función hepática a nivel molecular. Sin embargo, generalmente son inadecuadas para evaluar rigurosamente los efectos de la composición de aminoácidos, porque muchas líneas requieren medio que contenga suero para su mantenimiento. Aquí, nuestro objetivo fue investigar los efectos de la ornitina y la arginina, que están incluidos en el proceso metabólico característico en los hepatocitos, sobre una línea celular derivada de hepatoma humano (FLC-4) que puede ser cultivada en medio libre de suero. Las células FLC-4 se cultivaron en las siguientes tres condiciones: + ornitina/ - arginina, - ornitina/ - arginina, y - ornitina/ + arginina. La expresión de la albúmina evaluada mediante reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa y ensayo inmunoenzimático no mostró diferencias obvias basadas en la presencia de ornitina o arginina. Sin embargo, los niveles de ARNm de dos factores de transcripción enriquecidos en el hígado (CEBPB y HNF1A), que están involucrados en la regulación de la expresión de albúmina, fueron significativamente más altos en las células cultivadas en medio que contenía arginina que en las células cultivadas en medio que contenía ornitina. La transferencia Western mostró que los niveles de ambas isoformas activadoras e inhibitorias de C/EBPβ se incrementaron significativamente en las células cultivadas en medio de arginina. Además, hemos encontrado que la depleción de ambos, ornitina y arginina, las fuentes de poliaminas, en el medio no causó deficiencia de poliaminas. Cuando se agotaron la ornitina y la arginina, la producción de albúmina se redujo significativamente a nivel de ARNm, los niveles de ARNm de CEBPB aumentaron y el nivel de la forma activadora de C/EBPβ también aumentó. Los resultados de este estudio sugieren que en los hepatocitos, estos dos aminoácidos podrían tener funciones diferentes, y debido a esto, generan respuestas celulares dispares.