Características fenotípicas y funcionales de las células de Langerhans activadas in vivo.

Después de un cultivo a corto plazo (2 a 3 días), las células de Langerhans (LC) exhiben un aumento en el antígeno MHC de clase II y se convierten en APC más potentes que las LC obtenidas frescas en la activación de células T alogénicas y singénicas primarias. Para determinar si las LC in vivo sufren cambios similares a las LC cultivadas, examinamos las características fenotípicas y funcionales de las LC recolectadas de la piel de la oreja de ratones naïve pintados con varios haptenos e irritantes primarios. A las 24 horas después de la aplicación de 3% de trinitroclorobenceno, las LC parecen más grandes y presentan tinción más intensa en hojas epidérmicas utilizando anticuerpos anti-I-A, y hubo un aumento de dos a tres veces en la expresión de I-A e I-E por las LC utilizando análisis de microfluorimetría de flujo. La expresión del antígeno CD45 no se alteró. Los perfiles de microfluorimetría de flujo mostraron la presencia de dos poblaciones diferentes de LC basadas en la intensidad de fluorescencia, es decir, una con la misma densidad de Ia que las LC no tratadas y la otra (que representa del 22 al 50% de todas las LC) con una densidad de Ia notablemente aumentada (es decir, un incremento de 10 veces en I-A e I-E). Este cambio fenotípico se observó solo con haptenos, como trinitroclorobenceno, dinitrofluorobenceno, oxazolina y aldehído cinámico. En contraste, la aplicación de 10 a 30% de lauril sulfato de sodio o controles de vehículo no indujo este cambio. Funcionalmente, las LC obtenidas de ratones pintados con haptenos indujeron un aumento de dos a cinco veces en la incorporación de 3H-TdR por células T singénicas o alogénicas, en comparación con números iguales de LC de ratones no tratados o tratados con vehículo o lauril sulfato de sodio. Por lo tanto, estos cambios fenotípicos y funcionales que ocurren in vivo son análogos a los observados cuando las LC se cultivan por períodos cortos de tiempo. Así, las LC activadas aparecen in vivo en respuesta a la aplicación epicutánea de haptenos y pueden representar un paso esencial en la sensibilización específica al hapteno.