OpaR controla el metabolismo de c-di-GMP en Vibrio parahaemolyticus

Vibrio parahaemolyticus, la principal causa de gastroenteritis asociada a mariscos en todo el mundo, tiene una fuerte capacidad para formar biopelículas sobre superficies. La detección de quorum (QS) es un proceso ampliamente utilizado por las bacterias para comunicarse entre sí y controlar la expresión génica a través de la secreción y detección de autoinductores. OpaR es el regulador maestro de QS de V. parahaemolyticus que opera bajo alta densidad celular (HCD). Se ha informado sobre la regulación por OpaR de la formación de biopelículas de V. parahaemolyticus, pero los mecanismos regulatorios aún no se comprenden completamente. El bis-(3′-5′)-cíclico di-GMP (c-di-GMP) es un segundo mensajero intracelular omnipresente que regula diversos comportamientos de las bacterias, incluida la activación de la formación de biopelículas. En este trabajo, mostramos que OpaR reprimió la formación de biopelículas y disminuyó la concentración intracelular de c-di-GMP en V. parahaemolyticus RIMD2210633. Se detectaron secuencias similares a OpaR dentro de las regiones reguladoras del ADN de scrA, scrG, VP0117, VPA0198, VPA1176, VP0699 y VP2979, que codifican un grupo de proteínas tipo GGDEF y/o EAL. Los resultados de los ensayos de qPCR, fusión LacZ, EMSA y huellas de DNasa I demostraron que OpaR se unió a las regiones del ADN aguas arriba de scrA, VP0117, VPA0198, VPA1176 y VP0699 para reprimir su transcripción, mientras que reguló positiva y directamente la transcripción de scrG y VP2979. Así, la regulación transcripcional de estos genes por OpaR condujo directamente a cambios en la concentración intracelular de c-di-GMP. La asociación directa entre QS y el metabolismo de c-di-GMP en V. parahaemolyticus RIMD2210633 favorecería el control preciso de la transcripción génica y de comportamientos bacterianos como la formación de biopelículas.