El factor estimulante de colonias de macrófagos es indispensable tanto para la proliferación como para la diferenciación de los progenitores de osteoclastos.

Se examinó el mecanismo de acción del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF) en el desarrollo de osteoclastos en un sistema de co-cultivo de células osteoblásticas de ratón y células del bazo. En este co-cultivo, se formaron células multinucleadas similares a osteoclastos (MNCs) en menos de 6 días en respuesta a 10 nM de 1 alfa,25(OH)2D3 agregado solo durante los últimos 2 días de cultivo. La adición simultánea de hidroxicarbamida durante los últimos 2 días inhibió completamente la proliferación de las células cultivadas sin afectar la formación de MNC estimulada por 1 alfa,25(OH)2D3. Un examen autoradiográfico utilizando 3H-timidina reveló que los progenitores de osteoclastos proliferaron principalmente durante los primeros 4 días, mientras que su diferenciación en MNCs ocurrió predominantemente durante los últimos 2 días de cultivo en respuesta a 1 alfa,25(OH)2D3. Cuando se agregó anticuerpo anti-M-CSF o anticuerpo anti-receptor de M-CSF ya sea durante los primeros 4 días o durante los últimos 2 días, la formación de MNC fue igualmente inhibida. En co-cultivos de células del bazo normales y células osteoblásticas obtenidas de ratones op/op, que no pueden producir M-CSF funcionalmente activo, la falta de M-CSF ya sea durante los primeros 4 días o durante los últimos 2 días no formó MNCs en respuesta a 1 alfa,25(OH)2D3 agregado durante los últimos 2 días. Estos resultados indican claramente que M-CSF es indispensable tanto para la proliferación de los progenitores de osteoclastos como para su diferenciación en osteoclastos maduros.