La asociación de GAP-43 con membranas resistentes a detergentes requiere dos residuos de cisteína palmitoilados

GAP-43 es una proteína abundante en los conos de crecimiento axonal de neuronas en desarrollo y en regeneración. Encontramos que GAP-43 estaba enriquecido en membranas resistentes a detergentes (MRDs) aisladas por extracción con Tritón X-100 de células de feocromocitoma PC12 y se pudo detectar en restos de membrana plasmática insolubles en detergente después de la extracción de células in situ. GAP-43 está palmitoilado en Cys-3 y Cys-4. La mutación de cualquiera de los residuos de Cys impidió la asociación con las MRDs. Una proteína híbrida que contenía los primeros 20 residuos de aminoácidos de GAP-43 fusionada a beta-galactosidasa se dirigió a las MRDs incluso de manera más eficiente que el propio GAP-43. Concluimos que los residuos de Cys palmitoilados en tándem pueden dirigir GAP-43 a las MRDs, definiendo una nueva señal para el direccionamiento a MRD. Proponemos que las cadenas aciladas saturadas en tándem o cercanas se distribuyen en dominios o "balsas" en la fase líquida ordenada, o una fase con propiedades similares, en las membranas celulares. Estas balsas se aíslan como MRDs después de la extracción con detergente. La proteína G heterotrimérica específica del cerebro Go, que puede ser regulada por GAP-43 in vitro, también estaba enriquecida en las MRDs de células PC12. La orientación de GAP-43 a las balsas puede funcionar para facilitar la señalización a través de Go. Además, la asociación con las balsas puede ayudar en la clasificación de GAP-43 en vesículas dirigidas axonalmente en la red trans-Golgi.