La clasificación cromosómica de espermatozoides de sementales mediante citometría de flujo induce estrés oxidativo en mitocondrias y ADN genómico

Hasta la fecha, el único método repetible para seleccionar espermatozoides por sexo cromosómico es la tecnología de clasificación de Beltsville que utiliza citometría de flujo. La mejora de esta tecnología en especies equinas requiere aumentar la conciencia sobre las modificaciones que el procedimiento de clasificación induce en la integridad de los espermatozoides. El estrés oxidativo se considera el fenómeno dañino principal, y cada vez hay más evidencia que considera el manejo de espermatozoides —incluida la clasificación por sexo— como un fundamento básico para el daño oxidativo. El objetivo de este estudio fue revelar si el procedimiento de clasificación por citometría de flujo aumenta la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS), e identificar si la producción de ROS se relaciona con el daño en el ADN en espermatozoides clasificados utilizando ensayos específicos basados en citometría de flujo. Después de la clasificación, el estrés oxidativo aumentó del 26% al 33% en controles de pre y post-incubación, y al 46% después de la clasificación por sexo (p < 0.05). Las proporciones del índice de fragmentación del ADN post-clasificación fueron aproximadamente un 10% más altas (31.3%); un efecto que aparentemente se condujo a través del daño oxidativo en el ADN, como lo reveló el ensayo de oxyDNA. El probable origen de este aumento en el estrés oxidativo se debe a la eliminación de suficiente plasma seminal debido a la extensión no fisiológica del esperma, junto con un efecto deletéreo de alta presión en las mitocondrias durante el procedimiento de clasificación.