Mejora de la Eficiencia de Entrega de ARNm a una Línea Celular T mediante la Modulación del Contenido de Lípidos PEG y Componentes de Fosfolípidos de Nanopartículas Lipídicas

(1) Antecedentes: Las células T son importantes células diana, ya que ejercen efectos citotóxicos directos sobre células infectadas/malignas y afectan las funciones regulatorias de otras células inmunitarias de manera específica al antígeno diana. Uno de los enfoques actuales para modificar la función de las células T es la transfección genética mediante vectores virales. Sin embargo, la inserción de las moléculas de ADN exógeno en el genoma conlleva el riesgo de mutagénesis, especialmente cuando se utiliza un cassette génico basado en transposones. En base a este escenario, la expresión transitoria de proteínas mediante un ARN mensajero transcrito in vitro (IVT-mRNA) se ha convertido en un tema de interés. El uso de nanopartículas lipídicas (LNPs) para la transfección de IVT-mRNA es una de las estrategias más prometedoras para introducir genes exógenos. En este estudio, informamos sobre el desarrollo de LNPs con eficiencias de transfección comparables a las de la electroporación en una línea celular T (células Jurkat). (2) Métodos: La eficiencia de transfección se mejoró mediante la optimización de los fosfolípidos y los componentes lipídicos conjugados con polietileno glicol (PEG). (3) Resultados: La modificación de la composición lipídica resultó en un aumento de 221 veces en la actividad de luciferasa en comparación con una formulación previamente optimizada. Tal alta actividad de transfección se debió a la captación eficiente mediante endocitosis dependiente de clatrina/dinamina y la escapatoria relativamente eficiente al citoplasma en una etapa temprana de la endocitosis.