Detección In Situ de Apoptosis mediante el Ensayo TUNEL: Una Visión General de las Técnicas

La apoptosis, o muerte celular programada, juega un papel importante en el desarrollo normal y la homeostasis de los tejidos adultos. La apoptosis también se ha vinculado a muchos estados de enfermedad, incluido el cáncer. Uno de los marcadores bioquímicos de la apoptosis es la generación de extremos 3'-hidroxilo libres en el ADN mediante el corte de la cromatina en fragmentos de longitud de oligonuleosoma simples y múltiples. El ensayo de marcado de extremos de cadena rotos mediado por TdT con dUTP-biotina (TUNEL) explota este marcador bioquímico al etiquetar los extremos expuestos del ADN, lo que permite la visualización de núcleos que contienen ADN fragmentado. Esta revisión describe el método general para la tinción TUNEL in situ de células en cultivo y secciones de tejido, y destaca las mejoras recientes en la técnica y las limitaciones del ensayo.