Interacción en vivo y en vitro entre el factor de transcripción humano MOK2 y la lámina nuclear A/C

Las proteínas MOK2 humanas y murinas son factores capaces de reconocer tanto ADN como ARN a través de sus motivos de dedo de zinc. Esta doble afinidad de MOK2 sugiere que MOK2 podría estar involucrado en la transcripción y regulación post-transcripcional de los genes diana de MOK2. El gen IRBP contiene dos elementos de unión a MOK2, un sitio de unión a MOK2 completo de 18 pb ubicado en el intrón 2 y el sitio esencial de unión a MOK2 (8 pb de sitio medio conservado de 3') ubicado en el promotor de IRBP. Hemos demostrado que MOK2 puede unirse a los 8 pb presentes en el promotor de IRBP y reprimir la transcripción de este promotor compitiendo con el activador CRX por la unión al ADN. En este estudio, identificamos una nueva interacción entre la lámina A/C y hsMOK2 utilizando el sistema de dos híbridos de levadura. La interacción, que fue confirmada por ensayos de GST pull-down y estudios de co-inmunolocalización en vivo, requiere el dominio ácido N-terminal de hsMOK2 y el dominio enrollado 2 de la lámina A/C. Además, mostramos que una fracción de la proteína hsMOK2 está asociada con la matriz nuclear. Por lo tanto, sugerimos que las interacciones de hsMOK2 con la lámina A/C y la matriz nuclear pueden ser importantes para su capacidad de reprimir la transcripción.