Interacción funcional entre c-Src y su objetivo mitótico, Sam 68

La tirosina quinasas c-Src fosforila y se une a una proteína de 68 kDa unida a ARN en células mitóticas. Hemos examinado el mecanismo y la consecuencia funcional de la interacción de c-Src con esta proteína, Sam 68 (asociada a Src en mitosis, 68 kDa). En homogeneizados de células completas, Sam 68 fue el sustrato predominante y la pareja de unión de c-Src sobreexpresada. Sam 68 mitótico, fosforilado en tirosina, se unió selectivamente a dominios SH2 recombinantes con afinidades significativamente diferentes (c-Src ≈ proteína activadora de Ras GTPasa > p85α (amino-terminal) > Grb2 ≫ p85α (COOH-terminal)). Sam 68 traducido in vitro también se unió selectivamente a dominios SH3 recombinantes, con la mayor afinidad para los dominios SH3 de Src y p85α. La unión a SH3 fue inhibida por péptidos específicos de Sam 68. Sam 68 traducido in vitro se unió directamente a poli(U) inmovilizado, y esto fue inhibido por la unión de dominios SH3 de Src y p85 a Sam 68. Los resultados sugieren que la selección de Sam 68 como un objetivo mitótico por c-Src es el resultado de una interacción altamente específica con los dominios SH2 y SH3 y que esta interacción puede modular la actividad de unión al ARN de Sam 68.