La estabilidad de Cdc6 es regulada por la ligasa de ubiquitina Huwe1 después del daño en el ADN

La proteína Cdc6 es un componente esencial de los complejos de pre-replicación (preRCs), que se ensamblan en los orígenes de la replicación del ADN durante la fase G1 del ciclo celular. Estudios anteriores han demostrado que, en respuesta a la radiación ionizante, Cdc6 es ubiquitinado por el complejo promotor de la anafase (APC(Cdh1)) de manera dependiente de p53. Sin embargo, encontramos que el daño en el ADN causado por la irradiación UV o la alquilación del ADN por metilmetanosulfonato (MMS) induce la degradación de Cdc6 independientemente de p53. Además, demostramos que la degradación de Cdc6 después de estas formas de daño en el ADN también es independiente de la fase del ciclo celular, de la fosforilación de Cdc6 en los residuos conocidos como objetivos de Cdk, o de las ligasas de ubiquitina E3 Cul4/DDB1 y APC(Cdh1). En cambio, Cdc6 se une directamente a una ligasa de ubiquitina E3 de la familia HECT, Huwe1 (también conocida como Mule, UreB1, ARF-BP1, Lasu1 y HectH9), y Huwe1 poliuquitina Cdc6 in vitro. La degradación de Cdc6 en células irradiadas con UV o en células tratadas con MMS requiere Huwe1 y se asocia con la liberación de Cdc6 de la cromatina. Además, las células de levadura que carecen del ortólogo de Huwe1, Tom1, tienen un defecto similar en la degradación de Cdc6. En conjunto, estos hallazgos demuestran un papel importante y conservado para Huwe1 en la regulación de la abundancia de Cdc6 después del daño en el ADN.