Regulación de microARN-10a del fenotipo proinflamatorio en endotelio susceptible a aterosclerosis in vivo e in vitro

Un estado proinflamatorio crónico precede el cambio patológico en las células endoteliales arteriales ubicadas en regiones de susceptibilidad a la aterosclerosis. Se investigaron las contribuciones potenciales de los microARNs reguladores a este desequilibrio mediante un perfil específico por sitio arterial en cerdos adultos normales. La expresión del microARN endotelial 10a (miR-10a) fue menor en las regiones susceptibles a aterosclerosis del arco aórtico interno y de las ramas aorto-renales que en otras partes. La expresión de Homeobox A1 (HOXA1), un conocido objetivo de miR-10a, fue aumentada en las mismas ubicaciones. Un análisis de microarreglos del transcriptoma endotelial de la reducción de miR-10a en células endoteliales aórticas humanas cultivadas (HAEC) identificó la inflamación mediada por IkappaB/NF-kappaB como la categoría principal de procesos biológicos regulados al alza. La fosforilación de IkappaBalpha, un prerrequisito para la proteólisis de IkappaBalpha y la activación de NF-kappaB, fue significativamente aumentada en los HAEC con reducción de miR-10a y se acompañó de un aumento en la expresión nuclear de NF-kappaB p65. Los biomarcadores inflamatorios proteína quimioatrayente de monocitos 1 (MCP-1), IL-6, IL-8, molécula de adhesión celular vascular 1 (VCAM-1) y E-selectina se elevaron tras la reducción de miR-10a. Por el contrario, la introducción de miR-10a (un aumento conservador de 25 veces) inhibió la expresión basal de VCAM-1 y E-selectina en HAEC. Dos reguladores clave de la degradación de IkappaBalpha--quinasa quinasa activada por mitógenos 7 (MAP3K7; TAK1) y gen beta-transducina que contiene repeticiones (betaTRC)--contienen un sitio de unión altamente conservado para miR-10a en la UTR 3'. Ambas moléculas fueron reguladas al alza por la reducción de miR-10a y suprimidas por la introducción de miR-10a, y se demostró evidencia de unión directa de miR-10a a la UTR 3' mediante ensayo de luciferasa. Estudios comparativos de expresión del endotelio ubicado en el arco aórtico susceptible a aterosclerosis y la aorta torácica descendente con protección contra aterosclerosis identificaron un MAP3K7, betaTRC, fosfo-IkappaBalpha y expresión nuclear p65 significativamente aumentados, sugiriendo que la expresión diferencial de miR-10a contribuye a la regulación de fenotipos endoteliales proinflamatorios en regiones susceptibles a aterosclerosis in vivo.