Exosomas plasmáticos como marcadores de respuesta terapéutica en pacientes con leucemia mieloide aguda

PROPÓSITO: Los exosomas aislados del plasma de pacientes con leucemia mieloide aguda (LMA) recién diagnosticados tienen contenidos elevados de proteína y factor de crecimiento transformante-beta 1 (TGF-β1) e inhiben la citotoxicidad de células asesinas naturales (NK) (Haematologica 96, p. 1302, 2011). Se evaluó un posible papel de los exosomas en la predicción de respuestas a la quimioterapia (CT) en pacientes con LMA que estaban en tratamiento. DISEÑO EXPERIMENTAL: Se obtuvo plasma de pacientes con LMA en el diagnóstico (n = 16); post-CT de inducción (n = 9); durante la CT de consolidación (n = 10); en remisión a largo plazo (Lt-CR, n = 5); y de voluntarios sanos (n = 7). Los exosomas se aislaron mediante cromatografía de exclusión por tamaño y ultracentrifugación. Se compararon los niveles de proteína exosomal, TGFβ-1 soluble (ELISA), y los perfiles de TGF-β1 (blots western) entre cohortes de pacientes. Los resultados se correlacionaron con el perfil cito-genético de los pacientes, el porcentaje de blastos leucémicos y el resultado. RESULTADOS: En el diagnóstico, los niveles de proteína y TGF-β1 fueron más altos (p < 0.009 y p < 0.004) en exosomas de LMA que en controles. Estos valores disminuyeron después de la CT de inducción (p < 0.05 y p < 0.004), aumentaron durante la CT de consolidación (p < 0.02 y p < 0.005) y se normalizaron en Lt-CR. Mientras que los niveles de TGF-β1 y de proteínas estaban correlacionados, el pro-péptido TGF-β1, el péptido asociado a latencia (LAP), o TGF-β1 maduro decoraron diferencialmente los exosomas aislados antes, durante y después de la CT. Solo se observó el pro-péptido TGF-β1 en exosomas de controles o pacientes en Lt-CR. Durante la CT de consolidación, los exosomas transportaron pro-péptido TGF-β1, LAP y bajos niveles de TGF-β1 maduro. La co-incubación de células NK con exosomas de LMA que contenían las tres formas de TGF-β1 indujo la regulación a la baja de la expresión de NKG2D. CONCLUSIÓN: Los cambios en el contenido de proteínas exosomales y/o de TGF-β1 pueden reflejar respuestas a la CT. El perfil exosomal puede sugerir la presencia de enfermedad residual en pacientes considerados en remisión completa.