Defectos de ritmo causados por mutaciones nulas recién ingenierizadas en el gen de criptocromo de Drosophila

Gran parte del conocimiento sobre la función del criptocromo en Drosophila proviene del análisis del mutante cryb. Varias características de la respuesta a la luz de esta variante implican ya sea que CRYb retiene capacidades fotoreceptivas circadianas o que rutas adicionales de entrada de luz independientes de CRY sirven a estos procesos. Para resolver potencialmente estos problemas, generamos mutantes knock-out de cry (cry0) mediante reemplazo genético. Se comportaron de manera anómalamente rítmica en luz constante (LL). Sin embargo, las moscas cry0 exhibieron frecuentemente dos componentes circadianos separados en LL, no observados en la mayoría de los análisis previos de cryb. Los fenotipos circadianos dependientes de la temperatura exhibidos por las moscas cry(0) sugieren que CRY está involucrado en el marcapasos central. Experimentos locomotores adicionales combinaron cry0 con una mutación de ceguera externa (norpAP24), que causó las disminuciones más severas de fotorecepción circadiana observadas hasta ahora. Se demostró previamente que las culturas cryb exhiben eclosión aperiodica o rítmica en estudios separados. Encontramos que cry0 eclosionó de manera solidamente periódica en ciclos de luz:oscuridad o en oscuridad constante. Además, tanto cry0 como cryb eclosionaron rítmicamente en LL. Estos hallazgos indican que el nuevo tipo cry0 causa defectos más profundos que la mutación cryb, implicando que CRYb retiene actividad residual. Dado que algunos individuos norpAP24 cry0 pueden re-sincronizarse a nuevos regímenes fóticos, existe una ruta de entrada de luz aún no determinada en Drosophila.