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Métodos técnicos FIG. 2. Hepatocitos fetales después de cuatro días en cultivo. x 900. Suspensiones centrifugadas a 500 r.p.m. durante cinco minutos a 4°C. Las células empaquetadas se lavaron una vez en el medio de cultivo y se centrifugaron nuevamente antes de resuspendarlas en una cantidad mínima del medio de cultivo. Las células hepáticas se cultivaron posteriormente después de la implantación mediante el método de Zuckerman, Tsiquaye y Fulton (1967). Los cultivos fueron examinados por iluminación de contraste de fase y por microscopía de fluorescencia después de ser teñidos con naranja de acridina. Se obtuvo un monocapa viable prácticamente confluyente de células después de 24 horas en cultivo, y después de 48 horas se observaron una serie de mitosis en las preparaciones (Fig. 1). Los restos celulares estaban presentes en pequeñas cantidades, particularmente en la periferia del cultivo y después de cuatro días las células estaban sanas y viables (Fig. 2). Con esta técnica es regular obtener al menos 32 cultivos de separación a partir de la suspensión celular contenida en un solo frasco. Es un placer agradecer a los miembros del Banco de Tejidos del Hospital Royal Marsden. La señorita Susan Baker, B.Sc., y la señorita Lorna Dunkley brindaron una excelente asistencia técnica.
C. Cripps (Mon,) estudió esta cuestión.
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