Unión de Cibacron azul F3GA a proteínas que contienen el pliegue de dinucleótidos.

Se describe un procedimiento espectrofotométrico simple, conveniente y sensible para la medición cuantitativa de los sitios de unión de fosfato de nucleósido construidos por el pliegue de dinucleótidos. El procedimiento implica la titulación espectral diferencial de tales enzimas con el tinte Cibacron azul F3GA en una región espectral distante de la absorbancia intrínseca de proteínas o ligandos naturales. Las curvas de titulación pueden ser analizadas para determinar la afinidad de los sitios de unión de fosfato de nucleósido tanto por el tinte como por el ligando natural en un potencialmente amplio rango de condiciones experimentales. Se ilustra la interacción del tinte con dos proteínas que contienen el pliegue de dinucleótidos, lactato deshidrogenasa (L-lactato:NAD+ oxidoreductasa, EC 1.1.1.27) y quinasa de fosfoglicerato (ATP:3-fosfo-D-glicerato 1-fosfotransferasa, EC 2.7.2.3).