El homólogo mamífero de la levadura Sec13p está enriquecido en el compartimento intermedio y es esencial para el transporte de proteínas del retículo endoplásmico al aparato de Golgi

El papel de los componentes de COPII en el transporte del retículo endoplásmico (RE)-Golgi, identificado por primera vez en la levadura Saccharomyces cerevisiae, aún no se ha caracterizado completamente en eucariotas superiores. Se ha clonado previamente un cDNA humano cuya secuencia de aminoácidos predicha mostró un 70% de similitud con la levadura Sec13p. Los anticuerpos generados contra la proteína humana SEC13 (mSEC13) reconocieron una proteína celular de 35 kDa en las fracciones soluble y de membrana. Al igual que la levadura Sec13p, la mSEC13 existe en el citosol en formas monoméricas y de alto peso molecular. La microscopía de inmunofluorescencia localizó la mSEC13 en el característico compartimento intermedio ER-Golgi (ERGIC) en células de todas las especies examinadas, donde se colocalizó bien con el receptor KDEL, un marcador de ERGIC, a 15 grados C. La microscopía inmunoelectrónica también localizó la mSEC13 en estructuras de membrana cercanas al aparato de Golgi. La mSEC13 es esencial para el transporte de RE a Golgi, ya que tanto la proteína recombinante mSEC13 etiquetada con His6 como el anticuerpo mSEC13 purificado por afinidad inhibieron el transporte de la proteína G del virus de estomatitis vesicular arrestado a temperatura restrictiva del RE al aparato de Golgi en un ensayo de célula semi-intacta. Además, el citosol inmunodepletado de mSEC13 ya no podía soportar el transporte RE-Golgi. El transporte pudo restaurarse de manera dependiente de la dosis mediante una fracción de citosol enriquecida en el complejo mSEC13 de alto peso molecular, pero no por una fracción enriquecida en mSEC13 monomérica o recombinante. Como un componente putativo del complejo COPII mamífero, la mSEC13 mostró propiedades parcialmente superpuestas pero mayormente diferentes en términos de localización, reclutamiento de membrana y dinámica en comparación con las de beta-COP, un componente del complejo COPI.