सूक्ष्म-प्लाक परीक्षण: बैक्टीरियोफेज़ का पता लगाने, अलग करने और विशिष्टता पहचानने के लिए एक उच्च-थ्रूपुट विधि

सार बैक्टीरियोफेज़ (फेज़) के अलगाव और विशिष्टता की पहचान के लिए स्वर्ण मानक, प्लाक परीक्षण, 100 वर्षों से लगभग अपरिवर्तित रहा है। इसकी स्केलेबिलिटी में सुधार की आवश्यकता व्यक्तिगत फेज चिकित्सा में सफलता के कारण और भी महत्वपूर्ण हो गई है, जिसमें बड़े फेज पुस्तकालयों और तेजी से संवेदनशीलता परीक्षण की आवश्यकता होती है। एक रोबोटिक पिनिंग प्लेटफ़ॉर्म का उपयोग करते हुए, हमने बैक्टीरियल लॉन से 100 नैनोलीटर अवकाश का उपयोग करते हुए सूक्ष्म-कोलोनियों के लिए प्लाक परीक्षणों का लघुकरण किया, जिससे थ्रूपुट में >1000 गुना वृद्धि हुई है बिना संवेदनशीलता को प्रभावित किए। एक समान मैनुअल कार्यप्रवाह जिसमें थ्रूपुट का एक चौथाई था ने वही संवेदनशीलता बनाए रखा। ये सूक्ष्म-प्लाक परीक्षण प्लाक परीक्षणों का स्थान ले सकते हैं और फेज जीवविज्ञान में एक नए स्वर्ण मानक के रूप में उभर सकते हैं। सिद्धांत के प्रमाण के रूप में, हमने एक एकल पर्यावरणीय नमूने से 21 अद्वितीय पseudomonas aeruginosa फेज़ को अलग करने और पुनरुत्पादन करने के लिए अपनी तकनीक का उपयोग किया। फिर हमने दर्शाया - वही परीक्षण का उपयोग करते हुए - कि 17 मल्टी-ड्रग प्रतिरोधी नैदानिक P. aeruginosa उपभेदों में से 15 एक या अधिक 21 परीक्षण किए गए फेज़ के द्वारा संक्रमण के प्रति संवेदनशील थे। विधि तेजी से फेज़ का अलगाव और पुनरुत्पादन की अनुमति देती है, साथ ही फायदेमंद बैक्टीरियल उपभेदों के खिलाफ बड़े फेज पुस्तकालयों की स्क्रीनिंग को सक्षम बनाती है।