rRNA-FISH का उपयोग करते हुए विभिन्न वृद्धि चरणों में एकल बैक्टीरिया कोशिकाओं में राइबोसोमल स्तरों की तुलना के लिए प्रोटोकॉल

एकल कोशिकाओं में राइबोसोम की मात्रात्मकता आमतौर पर राइबोसोमल प्रोटीन के फ्लोरोसेंस टैगिंग के माध्यम से प्राप्त की जाती है। यहां, हम बैक्टीरिया में विभिन्न वृद्धि चरणों में राइबोसोमल स्तरों की तुलना करने के लिए rRNA (rRNA-FISH) के फ्लोरोसेंस इन सिटू हाइब्रिडाइजेशन का उपयोग करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, जो इच्छित स्टेन के आनुवंशिक इंजीनियरिंग की आवश्यकता को समाप्त करता है। हम बैक्टीरिया के नमूनों को तैयार करने, फ्लोरोसेंट प्रॉब्स के साथ रंगाई करने और फ्लो साइटोमेट्री और माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके डेटा एकत्र करने के कदमों का विवरण प्रदान करते हैं। इसके अलावा, हम सिग्नल स्थानिकी विश्लेषण के माध्यम से उचित लेबलिंग के लिए नियंत्रण के दिशानिर्देश प्रदान करते हैं। इस प्रोटोकॉल के उपयोग और निष्पादन पर पूर्ण विवरण के लिए कृपया Ciolli Mattioli et al. का संदर्भ लें।