प्राथमिक कोशिकाओं में RNAi द्वारा लेन्टीवायरस-प्रेषित स्थिर जीन मौन

जीनोम-व्यापी आनुवंशिक दृष्टिकोणों ने Saccharomyces cerevisiae, Drosophila melanogaster, और Caenorhabditis elegans जैसे मॉडल जीवों में जैविक महत्व के रास्तों की जांच के लिए उपयोगी साबित हुए हैं, लेकिन समान तकनीकों को स्तनधारी प्रणालियों पर लागू करना कठिन साबित हुआ है। हालांकि चूहे की जीनोम का हेरफेर जीनों और उनके कार्य की पहचान की ओर ले गया है, यह दृष्टिकोण श्रमसाध्य, महंगा है, और अक्सर घातक फेनोटाइप की ओर ले जाता है। RNA हस्तक्षेप (RNAi) एक विकासात्मक रूप से संरक्षित जीन मौन की प्रक्रिया है जो प्रतिकारी आनुवंशिकी द्वारा जीन कार्य की जांच के लिए एक शक्तिशाली उपकरण बन गई है। यहां हम हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) को लक्षित करते हुए हेयरपिन RNA व्यक्त करने वाले कैसट्स की डिलीवरी का वर्णन करते हैं, जो Moloney ल्यूकेमिया वायरस-आधारित और लेन्टीवायरस-आधारित रेट्रोवायरल वेक्टर का उपयोग करते हैं। दोनों परिवर्तित सेल लाइनों और प्राथमिक डेंड्रिटिक कोशिकाओं ने, जो सामान्यत: ट्रांसफेक्शन-आधारित जीन ट्रांसफर के लिए प्रतिरोधी होती हैं, लक्षित जीनों का स्थिर मौन प्रदर्शित किया, जिसमें सामान्य मानव फाइब्रोब्लास्ट में ट्यूमर सप्रेसर जीन TP53 शामिल है। यह रिपोर्ट यह दर्शाती है कि Moloney ल्यूकेमिया वायरस और लेन्टीवायरस वेक्टर-प्रेरित RNAi के व्यक्तित्व विभिन्न जैविक प्रणालियों में प्रभावी, स्थिर जीन मौन प्राप्त कर सकते हैं और प्राथमिक कोशिकाओं सहित कई कोशिका प्रकारों में जीन कार्यों को स्पष्ट करने में मदद करेंगे।