बाफिलोमिकिन A1 V-ATPase-निर्भर अम्लीकरण और Ca-P60A/SERCA-निर्भर ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन को रोककर ऑटोफैगिक प्रवाह को बाधित करता है

ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन और ऑटोलीसोसोम अम्लीकरण ऑटोफैगी प्रक्रिया के अंतिम चरण हैं, जो कार्यात्मक ऑटोफैगिक प्रवाह और कोशिकीय होमियोस्टेसिस को बनाए रखने के लिए आवश्यक हैं। इन दोनों चरणों को V-ATPase अवरोधक बाफिलोमिकिन A1 द्वारा बाधित किया गया है, लेकिन इन्हें जोड़ने वाले संभावित तंत्र स्पष्ट नहीं हैं। हमने हाल ही में Drosophila में एक इन-विवो दृष्टिकोण का उपयोग करके ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन में लाइसोसोमल अम्लीकरण की भूमिका का पुनरावलोकन किया। V-ATPase की व्यक्तिगत उपइकाइयों को आनुवंशिक रूप से कम करके, हमने लाइसोसोमल अम्लीकरण और ऑटोफैगिक कार्गो अपघटन में इसकी भूमिका की पुष्टि की। आश्चर्यजनक रूप से, V-ATPase-हीन कोशिकाओं में वेसिकल संलयन सक्रिय रहा, जो दर्शाता है कि ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन और ऑटोलीसोसोम अम्लीकरण 2 अलग प्रक्रियाएँ हैं। इसके विपरीत, बाफिलोमिकिन A1 ने अम्लीकरण और संलयन दोनों को रोका, जो स्तनधारी कोशिकाओं में इसके प्रभावों के अनुरूप है। कुल मिलाकर, ये परिणाम यह संकेत करते हैं कि यह दवा V-ATPase-मध्यस्थ अम्लीकरण पर अपने प्रभाव के स्वतंत्र रूप से संलयन को रोकती है। हमने ER-कैल्शियम ATPase Ca-P60A/dSERCA को बाफिलोमिकिन A1 का एक नया लक्ष्य पहचाना। Ca-P60A/dSERCA-हीन कोशिकाओं में ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन दोषपूर्ण था, और बाफिलोमिकिन A1 ने साइटोसोलिक कैल्शियम सांद्रता में एक महत्वपूर्ण वृद्धि का कारण बना और Ca-P60A/SERCA-मध्यस्थ संलयन को बाधित किया। इस प्रकार, बाफिलोमिकिन A1 V-ATPase-निर्भर अम्लीकरण और Ca-P60A/SERCA-निर्भर ऑटोफैगोसोम-लाइसोज़ोम संलयन को स्वतंत्र रूप से रोककर ऑटोफैगिक प्रवाह को बाधित करता है।