Bacillus circulans WL-12 के चिटिनेस A1 में ग्लूटामिक एसिड 204 और एस्पार्टिक एसिड 200 की पहचान, जो चिटिनेस गतिविधि के लिए आवश्यक अवशेष हैं।

प्रोकैरिकोटिक चिटिनेस, कक्षा III पौधों की चिटिनेस, खमीर की चिटिनेस, और एंडो-बेटा-N-एकेटिलग्लूकोसामिनिडेस प्रत्येक एंजाइम के कुछ क्षेत्रों में कमजोर अमीनो एसिड अनुक्रम समानताओं को साझा करते हैं। इन क्षेत्रों को एंजाइमों की कैटलिटिक गतिविधियों के लिए महत्वपूर्ण माना गया है। इस अनुमान का सत्यापन करने के लिए, Bacillus circulans WL-12 के चिटिनेस A1 में तीन अमीनो एसिड अवशेष (Ser-160, Asp-200, Glu-204) को चुना गया, जो अनुक्रम समानता साझा करने वाले क्षेत्रों के अमीनो एसिड अनुक्रम संरेखण के आधार पर थे, और इनका स्थान-निर्देशित उत्परिवर्तन द्वारा प्रतिस्थापित किया गया। 4-मिथाइलमबेलिफेरिल-N,N',N"-त्रीसेटिलचिटोट्रीज़ हाइड्रोलिसिस के लिए गतिकी पैरामीटर जंगली प्रकार और सात उत्परिवर्तित चिटिनेस के साथ निर्धारित किए गए। Glu-204-->Gln उत्परिवर्तन और Glu-204-->Asp उत्परिवर्तन वाले चिटिनेस मूल रूप से निष्क्रिय थे और इन चिटिनेस के kcat मान क्रमशः जंगली प्रकार की चिटिनेस के लगभग 1/5,000 और 1/17,000 थे। Asp-200-->Asn उत्परिवर्तन ने kcat मान को जंगली प्रकार के एंजाइम के लगभग 1/350 तक घटा दिया, जबकि Km मान केवल थोड़ी मात्रा में घटा। दूसरी ओर, Asp-200-->Glu उत्परिवर्तन से न तो kcat मान और न ही Km मान प्रभावित हुआ। इस प्रकार, यह प्रतीत होता है कि Glu-204 और Asp-200 सीधे चिटिनेस A1 की कैटलिटिक घटनाओं में शामिल हैं। Asp-200 के कार्बोक्सिल समूह की भूमिका Glu अवशेष के द्वारा पूरी तरह से प्रतिस्थापित की जा सकती है। Ser-160-->Ala उत्परिवर्ती ने जंगली प्रकार की चिटिनेस की 10% गतिविधि बनाए रखी, जो यह संकेत देती है कि Ser-160 का हाइड्रॉक्सिल समूह कैटलिटिक गतिविधि के लिए अनिवार्य नहीं है। ये परिणाम चिटिनेस के लायसोzyme-प्रकार के कैटलिटिक तंत्र को इंगित करते हैं।