मेथानोसार्किना जाति के आर्किया के लिए एक आनुवांशिक प्रणाली: लिपोसोम-स्थगित परिवर्तन और शटल वेक्टर्स का निर्माण

नए तरीके जो, पहली बार, मेथानोसार्किना जाति के आर्किया में आनुवांशिक विश्लेषण की अनुमति देते हैं, प्रस्तुत किए गए हैं। पहले, स्वायत्त रूप से पुनःप्रकृति करने वाले प्लास्मिड शटल वेक्टर्स का निर्माण किया गया है जो मेथानोसार्किना ऐसेटिवोरंस से स्वाभाविक रूप से होने वाले प्लास्मिड pC2A पर आधारित हैं। ये वेक्टर्स 11 में से 9 मेथानोसार्किना स्ट्रेन में और एशेरिचिया कोली में पुनःप्रकृति करते हैं। दूसरे, लिपोसोम द्वारा DNA के परिचय पर आधारित एक अत्यधिक कुशल परिवर्तन प्रणाली विकसित की गई है। यह विधि 10(9) कोशिकाओं के प्रति माइक्रोग्राम DNA पर 2 x 10(8) परिवर्तनकर्ताओं के रूप में परिवर्तन आवृत्तियों की अनुमति देती है या लगभग 20% प्राप्तकर्ता जनसंख्या के। इस काम के दौरान, pC2A का पूर्ण 5467-bp DNA अनुक्रम निर्धारित किया गया। इन निष्कर्षों के मथानोआर्कियाल अनुसंधान के भविष्य के लिए निहितार्थों पर भी चर्चा की गई है।