एनैक्सिन V रंगाई विधि द्वारा फ्लो सायटометрरी से एपोप्टोसिस परीक्षण का प्रोटोकॉल

यह परीक्षण उन कोशिकाओं की संख्या गिनने के लिए उपयोग किया जाता है जो एपोप्टोसिस का सामना करती हैं। एपोप्टोसिस का पता लगाने के लिए सबसे पहले कोशिकाओं को एनैक्सिन V और प्रोपिडियम आयोडाइड समाधान के साथ रंगा जाएगा, इसके बाद फ्लो सायटометрरी विश्लेषण किया जाएगा। यह इस सिद्धांत पर आधारित है कि सामान्य कोशिकाएं स्वभाव से हाइड्रोफोबिक होती हैं क्योंकि वे आंतरिक झिल्ली (साइटोप्लाज्म की ओर वाली सतह) में फॉस्फेटिडिल सिराइन व्यक्त करती हैं और जब कोशिकाएं एपोप्टोसिस का सामना करती हैं, तो आंतरिक झिल्ली उलटकर बाहरी झिल्ली बन जाती है, इस प्रकार फॉस्फेटिडिल सिराइन को उजागर करती है। उजागर फॉस्फेटिडिल सिराइन का पता एनैक्सिन V द्वारा लगाया जाता है, और प्रोपिडियम आयोडाइड नेक्रोटिक कोशिकाओं को रंगता है, जिनका DNA सामग्री लीक हो जाता है जो एपोप्टोटिक और नेक्रोटिक कोशिकाओं को अलग करने में मदद करती है।