BALB/c चूहों से मोनोक्लोनल IgG1, IgG2a, और IgG2b के टुकड़ों का विखंडन।

BALB/c मोनोक्लोनल IgG1, IgG2a, और IgG2b से F(ab')2 टुकड़ों के उत्पादन और शुद्धीकरण के लिए पेप्सिन और अन्य प्रोटीजेस के साथ विधियों का अध्ययन किया गया। विखंडन के प्रति कुल संवेदनशीलता IgG2b > IgG2a > IgG1 है। IgG1 से पेप्सिन के साथ pH 3.5 से 4.0 पर अच्छे उत्पादन में स्थायी F(ab')2 का उत्पादन किया जा सकता है और इसे IgG1 युक्त ऐसाइटिक तरल पदार्थों या सेल कल्चर सुपरनैटेंट्स के सीधे पेप्सिन उपचार द्वारा बनाया जा सकता है। IgG2a को पेप्सिन द्वारा दो चरणों में काटा जाता है, सबसे पहले F(ab')2 और फिर Fab' में। सावधानीपूर्वक चुने गए परिस्थितियों के साथ, F(ab')2 को स्वीकार्य उपज में प्राप्त किया जा सकता है। IgG2a भारी श्रंखला के लिए प्राथमिक कटाव इंटरहेवी चेन डाइसल्फाइड्स के COOH टर्मिनल पक्ष पर प्रतीत होता है, और द्वितीयक कटाव NH2-टर्मिनल पक्ष पर होता है। IgG2b के लिए उलटा सच है, और F(ab')2 को उपयोगी मात्रा में नहीं प्राप्त किया गया है; हालाँकि, IgG2b का प्राथमिक कटाव दो भारी श्रंखलाओं के सन्दर्भ में विषम प्रतीत होता है, और Fab/c टुकड़े जो एक Fab प्लस Fc के साथ होते हैं, बनाए जा सकते हैं। इलास्टेज के साथ पाचन Fab/c की सर्वश्रेष्ठ उपज में परिणामित हुआ। यह खोज मोनोक्लोनल एंटीबॉडीज में कोशिका सतह एंटीजन के खिलाफ साइटोटॉक्सिसिटी को बनाए रखने के लिए एक विधि प्रदान कर सकती है जबकि उनके मड्यूलेट करने की क्षमता को समाप्त करते हुए। IgG की तीन श्रेणियों के कटाव पैटर्न उनके हिंग क्षेत्र की संरचना के अनुसार तर्कित किए जाते हैं।