AP-2 उपयोजक का उपांग डोमेन क्लैथरीन-कोटेड पिट्स के संयोजन या इन्वैजिनेशन के लिए आवश्यक नहीं है।

कोटेड पिट्स में एक निवासी मेम्ब्रेन अणु (अणु) होता है जो क्लैथरीन AP-2 के साथ उच्च क्षमता से बंधता है। इस साइट पर AP-2 का बंधन कोटेड पिट के संयोजन में पहला कदम होना संभावना है क्योंकि यह उपयोजक क्लैथरीन के समतल बहुभुज जालियों में पोलीमराइजेशन के लिए एक टेम्पलेट के रूप में कार्य करता है। रिसेप्टर-मीडियेटेड एंडोसाइटोसिस में शामिल इंटेग्रल मेम्ब्रेन प्रोटीन नए संयोजित पिट्स में क्लस्टर करते हैं क्योंकि वे इन्वैजिनेट करते हैं और मेम्ब्रेन से बड करते हैं। AP-2 उपयोजक एक बहु-डोमेन, आणविक जटिलता है जिसे प्रोटियोलाइसिस द्वारा ईंट के आकार के कोर और कान-कैसे उपांग डोमेनों में अलग किया जा सकता है। हमने कोटेड पिट के संयोजन और बडिंग के विभिन्न चरणों में शामिल डोमेन की पहचान के लिए इस संपत्ति का उपयोग किया है। हमने पाया कि AP-2 का कोर वह डोमेन है जो संयोजन के दौरान मेम्ब्रेन और ट्रिस्केलियन्स दोनों से बंधता है। ट्रिस्केलियन्स मेम्ब्रेन बंधित कोरों पर जालियाँ बनाने में पूरी तरह सक्षम हैं। कोर डोमेनों से केवल जुड़े क्लैथरीन जालियों को भी सामान्य रूप से इन्वैजिनेट करने में सक्षम थे। सीमित प्रोटियोलाइसिस AP-2 बंधन साइट की आगे विशेषता के लिए भी उपयोगी था। अंदरूनी मेम्ब्रेन सतह के इलास्टेज उपचार ने एक पेप्टाइड अंश को मुक्त किया जो AP-2 को समाधान में बंधने में सक्षम है और इसे मेम्ब्रेन के साथ बातचीत करने से रोकता है। बंधन गतिविधि की क्षमता शुद्धिकरण से ऐसे पेप्टाइडों का संग्रह प्राप्त हुआ जिसमें 45-kD प्रजाति प्रमुख थी। यह AP-2-बंधन साइट के लिए उम्मीदवार पेप्टाइड है। इसलिए, उपांग डोमेन किसी भी संयोजन या इन्वैजिनेशन घटनाओं में सीधे भाग नहीं लेता है जो कोटेड पिट के कार्य के लिए आवश्यक है।