समय-समाधारित विद्युत्-मीटरिक और अप्टिकल अध्ययनों से पता चलता है कि साइटोक्रोम bd में इलेक्ट्रॉन-प्रोटॉन युग्मन का तंत्र दो-हीम सक्रिय स्थल में है

समय-समाधारित इलेक्ट्रॉन स्थानांतरण और विद्युत-जनित्र H(+) स्थानांतरण की तुलना Escherichia coli के bd-प्रकार के क्विनोल ऑक्सीडेज और इसके E445A उत्परिवर्तन में की गई है। उच्च-स्पिन हीम b(595) को एंजाइम द्वारा बनाए रखा गया है जो मूल प्रस्ताव के विपरीत है, लेकिन इसे डिथियोनाइट की अधिकता से भी कम नहीं किया जा सकता। जब इसे अपक्षयकों के साथ पूर्व-इंक्यूबेट किया जाता है, तो WT (b(558)(2+), b(595)(2+), d(2+)) और E445A उत्परिवर्तित ऑक्सीडेज (b(558)(2+), b(595)(3+), d(2+)) O(2) को तेजी से बाइंड करते हैं, लेकिन उत्परिवर्तित रूप में ऑक्सोफेरिल अवस्था का निर्माण WT एंजाइम की तुलना में लगभग 100 गुना धीमा है। साथ ही, E445A प्रतिस्थापन एक-इलेक्ट्रॉन-सम्पूर्ण एंजाइम में फेर्स हेम d से बंधित CO की फोटोलिसिस के बाद अंतःप्रोटीन इलेक्ट्रॉन पुनः संतुलन को प्रभावित नहीं करता है (जिसे "इलेक्ट्रॉन बैकफ्लो" कहा जाता है)। बैकफ्लो मेम्ब्रेन पोटेंशियल उत्पन्न करने से जुड़ा है। हीम d और b(558) के बीच इलेक्ट्रॉन स्थानांतरण विद्युत-जनित्र है। इसके विपरीत, हीम d और b(595) के बीच इलेक्ट्रॉन स्थानांतरण विद्युत-जनित्र नहीं है, हालाँकि हीम b(595) बैकफ्लो के दौरान हीम d के लिए प्रमुख इलेक्ट्रॉन स्वीकारकर्ता है, और इसलिए यह शुद्ध H(+) ग्रहण या रिलीज के साथ नहीं होता है। E445A प्रतिस्थापन एक-इलेक्ट्रॉन कम किए गए साइटोक्रोम bd E(m)(d) > E(m)(b(595)) में हीम b(595) और d के बीच इलेक्ट्रॉन वितरण को नहीं बदलता है, जहाँ E(m) मध्यवर्ती रेडॉक्स पोटेंशियल है; हालाँकि, यह हीम b(595) के अपक्षय को रोकता है, यह देखते हुए कि हीम d पहले ही पहले इलेक्ट्रॉन द्वारा अपक्षयित हो चुका है। अमूमन, E445 दो रेडॉक्स-लिंक्ड आयनायज करने योग्य समूहों में से एक है जो दो इलेक्ट्रॉनों द्वारा पूरी तरह से अपक्षयित होने पर दो-हीम ऑक्सीजन-अपक्षय स्थल (b(595), d) के लिए चार्ज संतुलन के लिए आवश्यक है।