प्रतिरक्षा कॉम्प्लेक्स के साथ अप्राइम किए गए मैक्रोफेज का उत्तेजना कैल्शियम-निर्भर न्यूरल नाइट्रिक-ऑक्साइड सिंथेज द्वारा नाइट्रिक ऑक्साइड का कम उत्पादन ट्रिगर करता है

IgG-ऑप्सनाइज्ड रोगाणुओं, कणों, या प्रोटीन से बने प्रतिरक्षा कॉम्प्लेक्स को मैक्रोफेज द्वारा Fcγ रिसेप्टर्स (FcγRs) के माध्यम से फागोसाइटोज़ किया जाता है। IFNγ या अन्य प्रो-इन्फ्लामेटरी मध्यस्थों के साथ प्राइम किए गए मैक्रोफेज FcγR संलग्नता पर उच्च स्तर के साइटोकाइनों और नाइट्रिक ऑक्साइड (NO) का स्राव करके प्रतिक्रिया करते हैं। हमने पाया कि अप्राइम किए गए मैक्रोफेज द्वारा NO के निम्न स्तर का उत्पादन किया गया, जो दक्ष कैल्शियम (Ca2+) प्रवाह की आवश्यकता थी जैसा कि सेलेनोप्रोटीन K के बिना मैक्रोफेज का उपयोग करके दर्शाया गया, जो FcγR- प्रेरित Ca2+ प्रवाह के लिए आवश्यक है। इसलिए, हमने कम उत्पादन NO और इसकी कार्यात्मक महत्वता में शामिल सिग्नलिंग पथों की और जांच की। प्रेरणीय, एंडोथेलियल, और न्यूरल नाइट्रिक-ऑक्साइड सिंथेज (iNOS, eNOS, और nNOS) का मूल्यांकन करने पर पता चला कि अप्राइम किए गए मैक्रोफेज में FcγR उत्तेजना ने कुल और फास्फोरिलेटेड nNOS दोनों में एक स्पष्ट Ca2+-निर्भर वृद्धि का कारण बना और फास्फोरिलेटेड eNOS के स्तर को थोड़ी बढ़ा दिया। इस रूप में तीन MAP काइनेज, ERK, JNK, और p38 भी सक्रिय हुए, जिनमें से ERK सक्रियता Ca2+ प्रवाह पर अत्यधिक निर्भर थी। ERK का अवरोध nNOS सक्रियता और NO स्राव दोनों को कम करता है। अंततः, ट्रांसवेल प्रयोगों ने दिखाया कि FcγR-प्रेरित NO अन्य मैक्रोफेज की फागोसाइटिक क्षमता को बढ़ाने के लिए कार्य करता है और इसके लिए NOS और ERK गतिविधि दोनों आवश्यक होती हैं। मैक्रोफेज द्वारा NO का उत्पादन पारंपरिक रूप से iNOS को सौंपा जाता है, लेकिन हमने अप्राइम किए गए मैक्रोफेज में एक iNOS-स्वतंत्र रिसेप्टर/एंजाइम प्रणाली का खुलासा किया है जो कम उत्पादन NO का उत्पादन करती है। इन परिस्थितियों में, FcγR संलग्नता Ca2+-निर्भर ERK फास्फोरिलेशन पर निर्भर करती है, जो बदले में nNOS और, कम हद तक, eNOS को बढ़ाती है, दोनों ही NO के निम्न स्तर का उत्पादन करते हैं जो फागोसाइटोसिस को बढ़ावा देने के लिए कार्य करते हैं।