FBS-मुक्त माध्यम का उपयोग करके A549 कोशिका संस्कृति की प्रासंगिकता और पुनरुत्पादन को अधिकतम करना

वैज्ञानिक महत्वपूर्ण शोध प्रश्नों के उत्तर देने के लिए इन विट्रो विधियों का उपयोग कर रहे हैं और इन विधियों की विश्वसनीयता और मानव प्रासंगिकता को अधिकतम करने की रणनीतियाँ लागू कर रहे हैं। एक रणनीति यह है कि भ्रूण गाय के सीरम (FBS) - जो बायोमोलेक्यूल्स का एक अपरिभाषित और परिवर्तनशील मिश्रण है - का उपयोग कोशिका संस्कृति माध्यम में रासायनिक रूप से परिभाषित या ज़ेनो-मुक्त माध्यम से प्रतिस्थापित किया जाए। इस अध्ययन में, A549 कोशिकाएँ, जो मानव फेफड़ों के अल्विओलर-जैसे कोशिका रेखा है और सामान्यतः श्वसन अनुसंधान में उपयोग की जाती हैं, को FBS युक्त संस्कृति माध्यम से FBS-मुक्त माध्यम में स्थानांतरित किया गया। सफल स्थानांतरण कोशिका आकृति विज्ञान और कार्यक्षमता के विश्लेषण के आधार पर निर्धारित किया गया। CnT-Prime Airway (CELLnTEC) या X-VIVO™ 10 (Lonza) माध्यम में संक्रमण के बाद, कोशिकाओं को सूक्ष्म दृष्टि से मूल्यांकन और डबलिंग समय की गणना द्वारा वर्णित किया गया। उनके जीनोटाइप, आकृति विज्ञान, और कार्यक्षमता का आकलन फेफड़ों की कोशिका प्रकारों के जीन मार्कर्स, सर्फेक्टेंट उत्पादन, साइटोकाइन रिलीज, मल्टीलेमलर शरीरों की उपस्थिति, और सोडियम डोडेसिल सल्फेट के संपर्क में आने के बाद कोशिका जीवनक्षमता की निगरानी करके किया गया। हमारे परिणामों ने दिखाया कि A549 कोशिकाएँ submerged और air-liquid-interface स्थितियों में सफलतापूर्वक FBS-मुक्त माध्यम में संक्रमण कर गईं। X-VIVO™ 10 माध्यम में उगाई गई कोशिकाएँ FBS-संपर्कित माध्यम की कोशिका विशेषताओं की नकल करती हैं जबकि CnT-Prime Airway माध्यम में उगाई गई कोशिकाएँ संभवतः सामान्य मानव अल्विओलर एपिथीलियल कोशिकाओं के अधिक क्रियात्मक विशेषताओं का प्रदर्शन करती हैं।