माइक्रोस्केल थर्मोफोरेसिस से पता चला कि cMyBP-C के केंद्रीय डोमेन सबमाइक्रोमोलर एफिनिटी के साथ मायोसिन S1 से बंधते हैं, जो दर्शाता है कि cMyBP-C फोल्डेड OFF स्थिति को स्थिर करने के लिए दो मायोसिन हेड्स को क्रॉसलिंक कर सकता है।
अन्य
माइक्रोस्केल थर्मोफोरेसिस कार्डियक मायोसिन नियमन के एक नए मॉडल को प्रकट करता है जहाँ cMyBP-C, PKA फॉस्फोराइलेशन से स्वतंत्र रूप से OFF स्थिति को स्थिर करने के लिए मायोसिन हेड्स को क्रॉसलिंक करता है।
मायोसिन-बाइंडिंग प्रोटीन C का कार्डियक आइसोफॉर्म (cMyBP-C) कार्डियक मायोफिलामेंट्स में पाया जाने वाला एक प्रमुख विनियामक प्रोटीन है जो एक्टिन-युक्त पतले और मायोसिन-युक्त मोटे फिलामेंट्स दोनों की सक्रियण स्थिति को नियंत्रित कर सकता है। हालांकि, थिन फिलामेंट-आधारित नियमन तंत्र के विपरीत, cMyBP-C द्वारा मायोसिन-आधारित नियमन के तंत्र को अभी विस्तार से परिभाषित किया जाना बाकी है। इस प्रक्रिया में इसके कार्य को स्पष्ट करने के लिए, हमने cMyBP-C और β-कार्डियक मायोसिन के पृथक टुकड़ों के बीच एक व्यापक इंटरैक्शन मैप तैयार करने हेतु माइक्रोस्केल थर्मोफोरेसिस का उपयोग किया। हम यहाँ दिखाते हैं कि cMyBP-C के नियामक N-टर्मिनल डोमेन (C0C2) क्रमशः डोमेन C1 और कार्डियक-विशिष्ट m-मोटिफ के फॉस्फोराइलेशन-स्वतंत्र और फॉस्फोराइलेशन-निर्भर इंटरैक्शन के माध्यम से माइक्रोमोलर एफिनिटी के साथ मायोसिन हेड (myosin S1) और टेल डोमेन (myosin S2) दोनों के साथ परस्पर क्रिया करते हैं। इसके अलावा, हम दिखाते हैं कि cMyBP-C और मायोसिन S1 के बीच उच्चतम एफिनिटी वाले इंटरैक्शन स्थल इसके केंद्रीय डोमेन में स्थित हैं, जो सबमाइक्रोमोलर एफिनिटी के साथ मायोसिन से बंधते हैं। हमने केंद्रीय C2C4 और C5C7 खंडों में दो अलग-अलग इंटरैक्शन क्षेत्रों की पहचान की जो मायोसिन S1 पर समान बाइंडिंग साइट के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं, जिससे यह सुझाव मिलता है कि cMyBP-C एक एकल मायोसिन अणु के दो मायोसिन हेड्स को क्रॉसलिंक कर सकता है और इस प्रकार इसे फोल्ड की गई OFF स्थिति में स्थिर कर सकता है। प्रोटीन किनेज A द्वारा कार्डियक-विशिष्ट m-मोटिफ के फॉस्फोराइलेशन का मायोसिन हेड डोमेन से N-टर्मिनल या केंद्रीय खंडों के बंधन पर कोई प्रभाव नहीं पड़ा, जिससे यह संकेत मिलता है कि यह cMyBP-C से जुड़े मायोसिन की एक निरंतर बाउंड स्थिति का प्रतिनिधित्व कर सकता है। अपने परिणामों के आधार पर, हम cMyBP-C द्वारा कार्डियक मायोसिन कार्य के नियमन का एक नया मॉडल प्रस्तावित करते हैं।
Ponnam et al. (Mon,) ने एक other की सूचना दी। cMyBP-C और बीटा-कार्डियक मायोसिन इंटरैक्शन की Microscale thermophoresis मैपिंग का मूल्यांकन cMyBP-C डोमेन और मायोसिन अंशों के बीच Interaction affinity पर किया गया था। Microscale thermophoresis से पता चला कि cMyBP-C के केंद्रीय डोमेन सबमाइक्रोमोलर एफिनिटी के साथ मायोसिन S1 से जुड़ते हैं, जिससे पता चलता है कि cMyBP-C फोल्डेड OFF स्थिति को स्थिर करने के लिए दो मायोसिन हेड्स को क्रॉसलिंक कर सकता है।