एक सक्रिय Fe हाइड्रोजेनेज के निर्माण के लिए आवश्यक दो नए रैडिकल S-एडेनोसिलमेथियोनिन प्रोटीन की खोज

H(2) के फोटोप्रोडक्शन के लिए आवश्यक जीनों की पहचान करने के लिए Chlamydomonas reinhardtii में यादृच्छिक डालने वाले उत्परिवर्ती क्लोनों का स्क्रीनिंग किया गया जिनमें H(2) बनाने की क्षमता नहीं थी। पहचाने गए उत्परिवर्तनों में से एक, जिसे hydEF-1 कहा जाता है, एक सक्रिय Fe हाइड्रोजेनेज बनाने में असमर्थ है। हालांकि hydEF-1 उत्परिवर्ती दोनों हाइड्रोजेनेज जीनों का ट्रांसक्रिप्शन करता है और पूर्ण-अवयव हाइड्रोजेनेज प्रोटीन को जमा करता है, H(2) उत्पादन गतिविधि नहीं देखी जाती है। HydEF प्रोटीन में दो अनोखे डोमेन होते हैं जो दो भिन्न प्रोकारियोटिक प्रोटीन, HydE और HydF के समान होते हैं, जो केवल उन जीवों में पाए जाते हैं जिनमें Fe हाइड्रोजेनेज होता है। C. reinhardtii जीनोम में, HydEF जीन एक अन्य हाइड्रोजेनेज-संबंधित जीन, HydG के निकट स्थित है। सभी जीव जिनमें Fe हाइड्रोजेनेज और अनुक्रमित जीनोम होते हैं, HydE, HydF और HydG के समरूप होते हैं, जिनका इस अध्ययन से पहले कोई ज्ञात कार्य नहीं था। कई प्रोकारियोटिक जीनोम में, HydE, HydF, और HydG को Fe हाइड्रोजेनेज संरचनात्मक जीनों के साथ संभावित ऑपेरॉन में पाया जाता है। HydE और HydG रैडिकल S-एडेनोसिलमेथियोनिन (आमतौर पर "Radical SAM" के रूप में निर्दिष्ट) प्रोटीन के उभरते सुपरफैमिली से संबंधित हैं। हम यहां प्रदर्शित करते हैं कि HydEF और HydG Fe हाइड्रोजेनेज के निर्माण में कार्य करते हैं। आंशिक ब्लॉट विश्लेषण से संकेत मिलता है कि HydEF जीन और HydG जीन के लिए mRNA ट्रांसक्रिप्ट दोनों C. reinhardtii Fe हाइड्रोजेनेज जीनों, HydA1 और HydA2 के साथ समानांतर में एनारोबिक रूप से प्रेरित होते हैं। bx;1C. reinhardtii hydEF-1 उत्परिवर्ती की पूरकता कर एक कार्यात्मक कॉपी के अणु DNA के साथ हाइड्रोजेनेज गतिविधि को पुनस्थापित करती है। अतिरिक्त रूप से, Escherichia coli में C. reinhardtii HydEF, HydG, और HydA1 जीनों का सह-व्यक्त्रीकरण एक सक्रिय HydA1 एंजाइम के निर्माण का परिणाम देता है। यह एक सक्रिय Fe हाइड्रोजेनेज के परिपक्वता के लिए आवश्यक सहायक जीनों की प्रकृति पर पहला रिपोर्ट है।