एकाधिक न्यूक्लिक एसिड अनुक्रम आधारित संवर्धन के माध्यम से मॉडल तैयार भोजन में कई आंतरिक वायरस का समानांतर पता लगाना

मानव आंतरिक वायरस वर्तमान में खाद्य-जनित रोगों के सबसे महत्वपूर्ण कारणों में से एक के रूप में मान्यता प्राप्त हैं। खाद्य-जनित प्रकोपों में आंतरिक वायरस की भूमिका की पुष्टि करना कठिन हो सकता है क्योंकि उपलब्ध पता लगाने की विधियों की अपर्याप्तता होती है। इस अध्ययन में, महामारीविज्ञान से जुड़े मानव आंतरिक वायरस की विशिष्ट, समानांतर और त्वरित पहचान के लिए एक न्यूक्लिक एसिड अनुक्रम आधारित संवर्धन (NASBA) विधि को एकाधिक प्रारूप में विकसित किया गया। हेपेटाइटिस ए वायरस और जनोग्रुप I और जनोग्रुप II नोरोवायरस के लिए RNA लक्षित टुकड़ों के संवर्धन के लिए एक एकल प्रतिक्रिया में तीन पूर्व-रिपोर्ट किए गए प्राइमर सेट का उपयोग किया गया, जिनकी लंबाई क्रमशः 474, 371 और 165 न्यूक्लियोटाइड थी। एम्प्लिकॉन को अगारोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा पहचाना गया और इलेक्ट्रोकेमिल्यूमिनेसेंस और नॉर्दन हाइब्रिडाइजेशन द्वारा पुष्टि की गई। एकाधिक NASBA परीक्षण के लिए अंत बिंदु पहचान संवेदनशीलता लगभग 10(-1) रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन-PCR-संवेदनशील यूनिट (या PFU, जैसा उचित हो) प्रति प्रतिक्रिया थी। जब प्रतिनिधि तैयार भोजन (डेली कटा हुआ टर्की और सलाद) को प्रत्येक वायरस की विभिन्न सांद्रताओं के साथ संक्रमित किया गया और एकाधिक NASBA विधि के साथ वायरस पहचान के लिए संसाधित किया गया, तो सभी तीन मानव आंतरिक वायरस को खाद्य वस्तुओं में 10(0) से 10(2) रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन-PCR-संवेदनशील यूनिट (या PFU)/9 cm2 की प्रारंभिक संक्रमित मात्रा पर समानांतर रूप से पहचाना गया। एकाधिक NASBA प्रणाली एक प्रतिक्रिया ट्यूब में नैदानिक रूप से महत्वपूर्ण खाद्य-जनित वायरस का त्वरित और समानांतर पता लगाने की सुविधा प्रदान करती है और खाद्य पदार्थों के वायरल संदूषण के लिए रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन-PCR के लिए एक आशाजनक विकल्प हो सकती है।