癌および人間の病気におけるマイクロRNAバイオマーカーを検証するための高感度および特異性プラットフォーム

我々は、全ての濃度において約±20%の精度をもたらすことを目的としたブランキングプロトコルを使用して、微量の核酸を検出および定量する技術を開発しました。健康な被験者および乳がん、前立腺がん、または膵臓がんを持つ患者からの血清および尿サンプル中のマイクロRNA（miRNA）let-7b、miR-15b、miR-21、miR-375およびmiR-141が測定されました。検出と定量は増幅なしで行われ、オスミウムタグ付きプローブとナノポアアレイ検出デバイスであるMinIONを使用して可能になりました。健康な男性の血清を参照として使用しました（Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA #H6914）。商業キットを使用して生体試料から分離された総RNAがmiRNA源として使用されました。前例のない±20%の精度により、miRNAコピー数は同じRNA含量に正規化されるべきであるという結論に至り、これにより（i）年齢、性別、民族性からの独立性、および（ii）血清と尿の間の同等性が示されました。がんにおけるmiR-21、miR-375およびmiR-141のコピーは1.8倍過剰発現し、健康なサンプルとの重複がゼロでありました。