LAMP-CRISPR/Cas12aシステムに基づく鶏アデノウイルス4型を検出するための迅速で超感度かつ非常に特異的な方法

鶏アデノウイルス4型（FAdV-4）は、鶏における水疱性心膜肝炎症候群の原因となる病原体であり、家禽産業に深刻な経済的影響をもたらします。FAdV-4感染の迅速かつ確実な検出は、効果的なウイルス予防および制御策を促進するために重要です。本研究では、ループ媒介等温増幅（LAMP）に基づくCRISPR/CRISPR関連タンパク質12a（Cas12a）システム検出プラットフォームが検討されました。CRISPR RNA（crRNA）とLAMPプライマーは、FAdV-4ヘキソン遺伝子の高保存領域に基づいて設計・スクリーニングされました。その後、理想的な反応性能を達成するためにパラメーターを個別に最適化しました。このプラットフォームは、専門的な機器や複雑な設備を必要とせずに、40分未満で1コピーまで視覚的検出が可能です。さらに、非常に特異的であり、他の一般的な鳥ウイルスとは交差反応しません。FAdV-4感染が疑われる30件の臨床サンプルの検証に続き、LAMP-CRISPR/Cas12a法によって生成された結果は、定量的リアルタイムPCRのゴールドスタンダードと完全に一致しました。要約すると、本研究はFAdV-4に対する新しい迅速で便利かつ低コストの検出プラットフォームを提示し、ウイルスの早期診断およびポイント・オブ・ケアテストに有益です。