エステル結合修飾の保存は、PARP1によるグルタミン酸およびアスパラギン酸のモノADPリボシル化とPARGによるその逆転を明らかにする

要旨 エステル結合後翻訳修飾、特にセリンおよびスレオニウムのユビキチン化は、重要な細胞シグナルとして認識されてきました。しかし、エステル結合の化学的な不安定性のため、これらの検出は依然として大きな課題です。これは、最近PARP1シグナルにおける役割が疑問視されているアスパラギン酸およびグルタミン酸のADPリボシル化のような古くから知られている修飾においても同様です。ここでは、エステル結合修飾を保存するための簡単に実装可能な方法を提示します。特定の感度を持つモジュラー抗体と質量分析と組み合わせることで、これらのアプローチはDNA損傷誘発性のアスパラギン酸/グルタミン酸のモノADPリボシル化を明らかにします。この以前は難解だったシグナルは、セリンのモノADPリボシル化のより持続的な性質とは対照的に、PARP1シグナルの初期波を表しています。予想外にも、ポリADPリボース加水分解酵素PARGが細胞内でエステル結合モノADPリボシル化を逆転させる能力を持つことを示しました。我々の方法論は、さまざまなADPリボシル化ライターの広範な調査を可能にし、ここで非標準的なユビキチン化に示されるように、他の新興のエステル結合修飾の探求への道を開きます。