β‐シトステロールは、miR‐181a‐3p/SHQ1シグナリングを抑制することにより、非小細胞肺癌細胞におけるアムロチニブ耐性を軽減する

要約 アムロチニブは進行非小細胞肺癌の治療に使用されますが、薬剤耐性の出現がその臨床応用を制限します。β‐シトステロールは肺癌の治療にも使用される可能性がありますが、アムロチニブ耐性の肺癌に対するβ‐シトステロールの評価に関する研究はありません。本研究の目的は、β‐シトステロールが肺癌細胞のアムロチニブに対する感受性を高めるメカニズムを明らかにすることでした。A549細胞に異なる濃度のアムロチニブを投与してアムロチニブ耐性細胞（A549/アムロチニブ細胞）を生成しました。miR‐181a‐3pミミックをA549/アムロチニブ細胞に導入しました。A549細胞およびA549/アムロチニブ細胞にさまざまな濃度のβ‐シトステロールを投与しました。細胞増殖を測定するためにCCK‐8アッセイを使用しました。アポトーシスはフローサイトメトリーによって評価しました。miR‐181a‐3pの発現を測定するためにリアルタイム定量PCRを使用しました。miR‐181a‐3pとH/ACAリボヌクレオプロテインアセンブリファクター（SHQ1）の相互作用は、miRDBおよびTargetScan Humanデータベースを使用して予測され、ルシフェラーゼレポータアッセイで検証されました。SHQ1、活性化転写因子6（ATF6）、およびグルコース調節タンパク質78（GRP78）の発現はウエスタンブロット分析によって測定されました。β‐シトステロールは、A549/アムロチニブ細胞の増殖を効果的に抑制し、アポトーシスを促進しました。SHQ1はmiR‐181a‐3pの下流標的です。miR‐181a‐3pの発現は抑制されましたが、SHQ1の発現はβ‐シトステロールによるA549/アムロチニブ細胞の治療によって増加しました。β‐シトステロールによるA549/アムロチニブ細胞におけるSHQ1、ATF6、およびGRP78タンパク質発現の抑制は、miR‐181a‐3pの増加によって救済されました。β‐シトステロールは、miR‐181a‐3pの抑制を介してSHQ1/UPRシグナリングを活性化することにより、アムロチニブ耐性のA549細胞のアポトーシスを著しく促進し、細胞増殖を抑制します。