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均一で非放射性、抗体を使用せず、多様なメチルトランスフェラーゼファミリーのための普遍的なアッセイを開発し、これらの酵素の活性をハイスループット形式でモニタリングすることを目的としています。アッセイ条件は、化学構造や酵素基質の性質に関係なく、幅広いメチルトランスフェラーゼの酵素活性をモニタリングするために最適化されています。アッセイはすべてのメチルトランスフェラーゼの共通反応生成物であるS-アデノシル-L-ホモシステインを検出します。このプロトコルを使用してDNA、タンパク質メチルトランスフェラーゼの活性を決定し、精製された酵素を使用していくつかの阻害剤のキネティックパラメータを決定する有用性を示しています。アッセイは高感度(S-アデノシル-L-ホモシステインの20-30 nM)で堅牢です。メチルトランスフェラーゼ Glo は非放射性で、抗体を使用せず、均一な、さまざまなメチルトランスフェラーゼファミリーの酵素活性を決定するための普遍的なアッセイです。このアッセイは、メチルトランスフェラーゼのモジュレーターを探す薬剤発見プログラムのハイスループットスクリーニングの要件を満たすようにフォーマットされています。
Hsiao et al. (Tue,) はこの問題を研究しました。