高分極化と低磁場緩和を用いたリガンド結合の単一スキャン検出

要約 核スピン-格子緩和率 1/ T 1 は、核スピンを持つ分子の相関時間 τ c に依存し、したがって、小さなリガンドがより大きなタンパク質に結合する際の τ c の変化を探ることができます。しかし、実際には、高磁場で得られる緩和率の差は小さいです。本研究では、核スピンを最初に DNP を用いて高分極化し、ターゲットタンパク質の存在下で低磁場で緩和させる手法を提示します。これにより大きな T 1 コントラストが生成されます。サンプルはその後、従来の核磁気共鳴プローブ（NMR）に移動され、低磁場の緩和効果が高磁場の液体状態 NMR を用いて読み取られます。13 C標識のレポータリガンド 14 μM のみを使用して、2 μM の低いタンパク質濃度でもタンパク質結合を信頼性高く観察しました。この手法は、競争的結合実験を通じてラベルなしリガンドにも拡張され、ラベルなしリガンドが 13 C標識のレポータリガンドを置換します。