長い合成タンデムリピートの迅速な生成とヒト人工染色体形成の分析への応用

ヒト人工染色体（HAC）は、キネトコア形成の研究と遺伝子治療における新世代ベクターの開発においてユニークな機会を提供します。HACにおけるセントロメアタンデムリピートの構造的および機能的関係を調査するには、リピートサブ構造を効率的に操作する能力が必要です。ここでは、数百塩基対のヒトアルファイドタンデムリピートを最大120 kbの長いDNAアレイに迅速に増幅する新しい方法を説明します。この方法は、in vitroでのリピートのローリングサークル増幅（RCA）と、酵母におけるin vivoの組換えによるRCA産物の組立を含みます。合成アレイは、ヒト細胞に導入されるとHAC形成に適しています。短いマルチマーは増幅前に簡単に修正できるため、この新しい技術はキネトコアシーディングに重要なリピートモノマー領域を特定できます。この方法は、染色体の組織化と動態における他のタンデムリピートの役割を明らかにするためのより一般的な応用があるかもしれません。