低酸素誘導因子1αのトランス活性化ドメインと抑制ドメイン

低酸素誘導因子1（HIF-1）は、エリスロポエチン、血管内皮成長因子、および他の遺伝子内のシス作用型低酸素応答要素に結合し、低酸素状態の細胞で転写を活性化します。HIF-1は、HIF-1αおよびHIF-1βサブユニットから構成される基本的なヘリックス-ループ-ヘリックス転写因子です。ここでは、HIF-1αがアミノ酸531から826の間に位置する2つのトランス活性化ドメインを含むことを示します。GAL4融合タンパク質として発現させた際、これらのドメインの転写活性は低酸素に応じて増加しました。融合タンパク質のレベルは、細胞のO2緊張の変化によって影響を受けませんでした。2つの最小トランス活性化ドメインは、アミノ酸残基531-575および786-826に局在していました。転写活性化ドメインは、トランス活性化を抑制するアミノ酸配列によって分離されていました。削除解析により、抑制ドメイン配列（アミノ酸576-785）の段階的な除去が融合タンパク質の転写活性の漸進的な増加と関連していることが示されました。特に20% O2で培養された細胞では顕著です。GAL4/HIF-1α融合タンパク質の転写活性は、1% O2、塩化コバルト、またはデスフェロキシアミンにさらされた細胞で増加しました。これらはいずれも内因性HIF-1αタンパク質のレベルを増加させましたが、融合タンパク質のレベルには影響を与えませんでした。これらの結果は、低酸素細胞におけるHIF-1を介した転写活性の増加が、HIF-1αタンパク質のレベルの増加とHIF-1αトランス活性化ドメインの活性の増加の両方によるものであることを示しています。