冷凍保存されたマウス骨髄細胞から骨髄由来マクロファージを生成するための方法

トランスジェニックおよび遺伝子標的マウスの広範な使用により、骨髄由来マクロファージ（BMDM）がマクロファージ生物学の調査における重要な哺乳類宿主細胞として確立されました。過去10年間で、可用性のある造血ヒト細胞を凍結・保存する方法についての広範な研究が行われましたが、凍結されたマウス骨髄（BM）細胞からBMDMを生成する情報はありません。本研究では、マウスBM細胞を凍結し、さらにBMDMを生成するための非常に効率的なプロトコルを確立しました。冷凍保存されたマウスBM細胞は、6年以上にわたりBMDM分化の可能性を維持します。新鮮なBM細胞と凍結されたBM細胞から得られたBMDMを比較したところ、両者はLPSや細胞内細菌レジオネラ・ニューモフィラ感染に応じてCD80およびCD86の発現を引き起こす能力は同様であることがわかりました。さらに、新鮮または凍結されたBM細胞から得られたBMDMは、L.ニューモフィラや原生動物寄生虫レイシュマニア（L.）アマゾネンシスなどの病原体の細胞内増殖を同様に制限または支持します。樹状細胞の生成にこの方法を使用することを裏付けるためにはさらなる調査が必要ですが、初期実験では、骨髄由来樹状細胞も冷凍保存されたBM細胞から生成できることが示されています。全体として、本研究で示され検証された方法は、凍結BM細胞のストックからBMDMを容易かつ迅速に生成できることを可能にする技術的進歩を表しています。