犬のグリコーゲン蓄積病Iaモデルにおける黄色ブドウ球菌Cas9を用いたゲノム編集

グリコーゲン蓄積病タイプIa (GSD Ia) は、グルコース-6-ホスファターゼ (G6Pase) の遺伝性欠乏症であり、生命を脅かす低血糖および肝細胞癌形成を含む長期合併症に関連しています。遺伝子置換療法は、G6Pase欠乏を安定的に逆転することに失敗しています。我々は、GSD Iaの犬モデルで、黄色ブドウ球菌Cas9タンパク質を発現する1つのアデノウイルス関連ウイルスベクターと、G6Paseをコードするドナー遺伝子を含むもう1つのベクターを使用してゲノム編集を試みました。治療を受けた3匹の成犬の肝臓においてドナー遺伝子の統合を示し、安定したG6Paseの発現と空腹時の低血糖の改善を伴いました。GSD Iaの2匹の子犬は、肝臓にドナー遺伝子の統合を達成するゲノム編集によって治療されました。統合頻度はすべての犬で0.5%から1%の範囲でした。治療を受けた成犬では、ゲノム編集前に抗SaCas9抗体が検出され、S. aureusへの以前の曝露を反映していました。核酸分解酵素活性は低く、SaCas9の切断予測部位でのインデル形成の低割合に反映され、非相同末端結合によって続く二本鎖切断を示しました。このように、ゲノム編集は、大動物モデルの肝臓に治療用遺伝子を統合でき、人生の早い段階または後の段階での治療が可能であり、GSD Iaに対するより安定した治療を提供するためのさらなる開発が必要です。