pEAQ：植物における異なるタンパク質の簡単かつ迅速な一過性発現のための多用途な表現ベクター

興味のある配列を含むバイナリベクターを用いた葉組織のアグロ侵入は、植物におけるタンパク質を発現させるための迅速な方法です。発現させる配列を修飾された5'-非翻訳領域（UTR）と、エンドウ豆モザイクウイルス（CPMV）RNA-2（CPMV-HT）からの3'-UTRで挟むことで、バイナリベクターpBINPLUS内で達成可能な発現レベルが大幅に向上することが最近示されました（Sainsbury, F. と Lomonossoff, G.P. (2008) Plant Physiol. 148, 1212-1218）。この発見を利用するため、一過性発現に特化した小型バイナリベクター群（pEAQベクターと呼ばれる）が作成されました。これらのベクターでは、pBINPLUSバックボーンおよびT-DNA領域から7 kb以上の非必須配列が除去され、同じプラスミド上に複数の発現カセット（サイレンシング抑制因子のカセットを含む）を収容可能なユニークな制限酵素部位が導入されました。これらのベクターにより、数日で単一プラスミドから複数のポリペプチドの高レベル同時発現が可能になります。さらに、制限酵素ベースのクローニングとGATEWAY再結合の両方を用いて、バイナリプラスミドへの遺伝子の直接クローニングを可能にするベクターも開発されています。どちらの場合も、N末端またはC末端のヒスジンタグを必要に応じてターゲット配列に融合することができます。これらのベクターは、標準的な植物研究技術を用いてベンチトップスケールで植物からミリグラム量の組換えタンパク質を産生するための簡単で迅速なツールを提供します。